Jeff Moreau (Joker)
Surnom donné par son instructeur qui le trouvait rarement souriant, Joker s’est rapidement illustré comme étant un pilote hors pair. Atteint de la maladie des os de verre, il fit parler son talent aux commandes du Normandy SR-1 puis du SR-2 sous le commandement du Capitaine Anderson et de Shepard.
Matriarche Benezia
Mère de Liara T’Soni, Benezia souhaite que son peuple soit mieux considéré et décide de rejoindre Saren pour devenir son exécutrice. Asservie par l’endoctrinement du Sovereign, l’un des plus puissants Moissonneurs, elle se transforme en l'esclave de Saren alors qu’elle souhaitait au départ le dissuader de semer le chaos.
Charles Pressly
Souhaitant suivre les traces de son grand-père, mort lors de la Guerre du Premier Contact, Charles embrasse une carrière d’officier à bord du SSV Agincourt avant d’être enrôlé par Anderson et embarquer sur le Normandy. Il participera par la suite à la poursuite de Saren aux côtés de Shepard.
Urdnot Wrex
Mercenaire krogan et chasseur de primes, Urdnot Wrex est un guerrier qu’il vaut mieux avoir dans son camp. Après avoir tué son père Jarrod, il quitte sa terre Tuchanka et finit, malgré quelques réticences envers la race humaine, par s’allier à la cause de Shepard.
Miranda Lawson
Créée en 2150 par manipulation de l’ADN de son père, Miranda est une biotique humaine qui s’est notamment illustrée en dirigeant le projet Lazar. Elle fera partie de la mission victorieuse contre les Récolteurs, puis se met en quête de dénoncer les agissements de l’Homme Trouble ainsi que ceux de son père.
Mordin Solus
Brillant scientifique, ce Galarien est un pragmatique qui travaille dans l’unique but de protéger les autres. Shepard le recrutera afin qu’il étudie les Moissonneurs et Récolteurs. Personnage attachant, il jouera un rôle primordial lors du génophage.
Grunt
Ce jeune Krogan n’obéit qu’à une seule règle : « frapper fort fait marcher droit » Ce rusé et féroce combattant rejoint l’équipe de Shepard sur le Normandy, pour notamment l’aider à faire de lui une légende pour son peuple.
Thane Krios
Thane est un « prêtre guerrier » appartenant à la race Drell. Puissant biotique capable de manipuler ses ennemis, Thane est considéré comme l’un des plus calmes mais aussi l'un des plus dangereux assassins de la planète. Shepard tentera d’ailleurs de l’enrôler pour qu’il combatte à ses côtés.
Aria T’Loak
Aria est la reine d’Omega, la capitale du crime des systèmes terminus. Elle tient le club Afterlife (puis le Purgatoire sur la Citadelle) et se spécialise dans le trafic d’informations. Elle se révélera être d’une aide primordiale pour Shepard.